1. Какво включват неклиничните изследвания?
отговор:Неклиничните експерименти включват фармакологични изследвания, тестове за обща токсичност, токсикокинетични и неклинични фармакокинетични експерименти, тестове за репродуктивна токсичност, тестове за генотоксичност, канцерогенност и други тестове (фототоксичност, зависимост, имунотоксичност) и т.н. В случаите на комбинирана терапия могат да се проведат и неклинични проучвания за безопасност на комбинираната терапия. За определен висок дял (повече от 10% от общата системна експозиция и нивото на експозиция при проучвания върху животни е по-ниско от експозицията при хора), може да се наложи провеждането на неклинични проучвания за безопасност на метаболитите.
2. Каква е целта на неклиничната оценка на безопасността?
отговор:Целта на неклиничната оценка на безопасността обикновено включва изясняване на характеристиките на реакцията на токсичност, свързани с целевите органи, зависимостта от дозата, връзката на експозицията и потенциалната обратимост. Тази информация може да се използва за оценка на безопасната начална доза и обхвата на дозите за клинични изпитвания при хора (както беше споменато по-рано, NOAEL трябва да се получи в токсикологични експерименти за изчисляване на MRSD, максималната препоръчителна начална доза), и за определяне на показатели за клинично наблюдение за потенциални нежелани реакции.
3. Какви неклинични изследвания са необходими за първите--изпитания върху хора?
отговор:За този въпрос първо е необходимо да се изясни вида на лекарството. ICH M3 (R2) е приложим за обичайни ситуации при разработването на лекарства и предоставя общи насоки. За биологичните продукти трябва да се провеждат неклинични изследвания в съответствие с изискванията на ICH S6.
⑴Фармакокинетика:Преди подаването на IND са достатъчни данни за метаболизма на изследвания продукт при различни видове и данни за in vitro метаболизма при хора, както и скоростта на свързване с плазмените протеини. Информацията за абсорбцията, разпределението, in vivo метаболизма и екскрецията трябва да бъде завършена преди широкомащабни клинични изпитвания (обикновено фаза 3). Експериментите за фармакокинетична абсорбция обикновено се провеждат при множество видове преди подаване на IND и определяне на PCC, за да се разберат по-добре фармакокинеичните характеристики на лекарството при различни видове, въпреки че тук не се изисква, което е малко странно.
⑵Фармакология за безопасност:Оценката на ефектите върху сърдечно-съдовата, централната нервна и дихателната системи трябва да бъде завършена преди подаването на IND, което е комбинация от стандартни фармакологични тестове за безопасност. Допълнителни фармакологични експерименти за безопасност могат да бъдат проведени по време на клиничните изпитвания, ако е необходимо.
⑶Токсичност при многократна доза:Обикновено краткосрочен-тест за хронична токсичност се организира въз основа на ранната схема на дозиране на IND. Ако периодът на дозиране трябва да бъде удължен по-късно, е необходим по-дългосрочен-тест за хронична токсичност, който да го подкрепи.
⑷Генотоксичност:С относително ниска цена комбинацията от тестове за генотоксичност може да бъде завършена преди подаването на IND.
⑸Канцерогенност:Тестването за канцерогенност трябва да бъде завършено преди одобрението на лекарството.
⑹Репродуктивна токсичност:Наблюденията и оценките на репродуктивната система трябва да бъдат включени в тестовете за токсичност при многократни дози преди подаване на IND за предварителна оценка на репродуктивната токсичност, като строгата контрацепция при клиничните изпитвания е достатъчна. Проучванията за репродуктивна токсичност във фаза I/II трябва да бъдат завършени преди широкомащабни-клинични изпитвания, а проучванията за репродуктивна токсичност във фаза III трябва да бъдат завършени преди одобрението.
⑺Фототоксичност:Оценката на фототоксичността трябва да бъде завършена преди подаването на IND. Ако моларната абсорбция е по-голяма от 1000 M-1cm-1, се счита, че съществува риск от фототоксичност и тестването за фототоксичност трябва да се проведе преди широкомащабни клинични изпитвания.
4. Как трябва да се определят дозите при токсикологичните тестове? Как трябва да се избере най-високата доза?
отговор:Позовавайки се на „Принципите на техническите насоки за тестове за токсичност при многократни дози на лекарства“, „По принцип високите дози трябва да предизвикват очевидни токсични реакции при животните, ниските дози трябва да са еквивалентни или по-високи от ефективната доза при животни или клинична употреба, а средните дози трябва да се задават между високи дози и ниски дози въз основа на токсичния механизъм и характеристики, за да се изследва връзката между доза-отговор на токсичността.“
На практика, като се има предвид скъпата цена на токсикологичните тестове, провеждането на тест за-откриване на обхвата на дозата (DRF) с няколко не-човекоподобни примати е най--рентабилният и-спестяващ труд метод. Дозата за DRF тестове също трябва да бъде допълнително определена въз основа на предварителни проучвания за безопасност, проведени по време на ранно определяне на PCC и фармакологични проучвания. Много институции сега също провеждат тестове за остра токсичност заедно с DRF тестове, които не са -GLP тестове, както е споменато в M3 (R2), следвайки принципа 3R за намаляване на използването на животни.
За групи с ниска, средна и висока доза обикновено се използва разстояние от 2-3 пъти. При официалните токсикологични тестове идеалната ситуация е групата с висока доза да може да демонстрира очевидна токсичност, а групите с ниска или средна доза могат да се използват като NOAEL.
В допълнение, за избора на най-високата доза, M3 (R2) също предоставя стандартни отговори. Казано с прости думи, най-високата доза в токсикологията трябва да бъде или максимално поносимата доза (MTD) или максимално възможната доза (MFD, която може да се разбира като максималната доза, която животните могат да понесат въз основа на характеристиките на продукта и животните), или трябва да постигне насищане на експозицията, или нивото на експозиция трябва да бъде достатъчно високо (достигащо 50 пъти планираната клинична доза). Като цяло 1000 mg/kg/ден се считат за достатъчни, освен ако предвидената клинична доза не достигне 1g/ден и нивото на експозиция от 1000 mg/kg не достигне 10 пъти нивото на клиничната експозиция, в който случай трябва допълнително да увеличите дозата до 10 пъти нивото на клинична експозиция, или 2000 mg/kg/ден, или MFD.
5. Кои проучвания в неклиничните изследвания за безопасност трябва да следват GLP и кои не?
отговор:Не е необходимо фармакологичните и фармакокинетичните изследвания да следват GLP, докато проучванията за фармакологията на безопасността, генотоксичността, репродуктивната токсичност и токсичността при многократни дози трябва да следват GLP.
6. Каква е продължителността на неклиничните проучвания за токсичност при многократни дози?
отговор:Изискванията за продължителност за подпомагане на провеждането на клиничното изпитване и одобрението на пазара са различни и трябва да бъдат специфични за периода на дозиране на клиничните изпитвания. Например за пациенти с множествена склероза минималният планиран период на клинично изпитване е две години. Следователно, когато се включват пациенти с множествена склероза в клинични изпитвания, се изисква 6-месечно проучване за хронична токсичност върху гризачи и 9-месечно проучване за хронична токсичност без гризачи, което е достатъчно, за да подкрепи одобрението на пазара. За не-онкологични лекарства обикновено се използва 4-седмично проучване за хронична токсичност, за да се поддържа период на дозиране, който не надвишава 4 седмици за първите клинични изпитвания върху хора.
7. Как да изберем експериментални животни за неклинична оценка на безопасността?
отговор:Обикновено се използват два вида животни, гризачи с плъхове са предпочитаният избор и не-гризачи с кучета бигъл. Разбира се, принципите за-специфичен анализ на конкретен продукт също трябва да се следват. За малки молекули, изборът на видове трябва да отчита главно метаболитните характеристики на изследвания продукт при животни, които са подобни на хората. Може да се направи препратка към „Тест за анализ и идентификация на метаболити на изследвани продукти при CD-1 мишки, SD плъхове, кучета бигъл, маймуни Cynomolgus и човешки чернодробни микрозоми“, като се избират видове с метаболитни характеристики, подобни на човешките, т.е. видове със сходни количества и видове метаболити с човешките. Освен това избраните видове трябва да са чувствителни към изследвания продукт. Въз основа на предишен опит, за лекарство с малка молекула, неговите метаболитни характеристики при кучетата Бийгъл може да са подобни на хората, но с ниска експозиция.
