Работната група за безопасност на олигонуклеотидите (OSWG), представлявана от водещи фармацевтични компании като AstraZeneca, Novo Nordisk, Cardior Pharmaceuticals и Alnylam Pharmaceuticals, наскоро публикува изчерпателна бяла книга, фокусирана върху проучванията за абсорбция, разпределение, метаболизъм и екскреция (ADME) на олигонуклеотидни лекарства (ОН).
ONs, разнообразен клас лекарства, състоящи се от химически синтезирани олигонуклеотидни едноверижни или двойноверижни вериги, вариращи обикновено от 12-30 рибонуклеотиди или дезоксирибонуклеотиди, имат значително терапевтично обещание. Те функционират чрез взаимодействия на сдвояване на бази на Watson-Crick с целеви нуклеотидни последователности, като по този начин се намесват в решаващи клетъчни процеси като генна експресия и транслация, за да коригират свързаните с болестта протеинови нередности. Този терапевтичен подход обхваща набор от ON, включително антисенс олигонуклеотиди (ASO), малка интерферираща РНК (siRNA), микроРНК (miRNA), малка активираща РНК (saRNA), аптамери и рибозими, между другото, като ASO и siRNA са най-често срещаните използван.
Въпреки изобилието от насоки относно фармакокинетичните изследвания, спецификите на ON налагат специфични стратегии, тъй като конвенционалните насоки често не успяват да обърнат внимание на техните уникални характеристики. В отговор на тази празнина OSWG очерта специализираниADME изследваниястратегии, насочени към насърчаване на най-добрите практики в развитието на ON.
I. Абсорбция
ONs показват отличителни характеристики по отношение на молекулно тегло, заряд и хидрофилност, което налага внимателно разглеждане при дизайна на изследването. Пътищата на приложение на ONs варират, включително интравенозно (IV), подкожно (SC), интратекално (IT), интрацеребровентрикуларно (ICV), инхалация и интравитреална инжекция (IVT).
1. ФК проучвания с еднократна доза:
Провеждане отделноФК проучвания с единична дозачесто е необходимо за новите молекули на ONs, за да установят решаващи корелации между концентрациите на лекарства в кръвта/цереброспиналната течност и тъканите. Въпреки това, платформи със стабилни основни данни могат да премахнат необходимостта от отделни фармакокинетични проучвания, като се има предвид сходството в свойствата на ADME сред съединенията в рамките на една и съща платформа.
Изборът на начин на приложение е в съответствие с планирания клиничен път, което налага неклинични фармакокинетични проучвания с IV дозиране за не-IV клинични пътища за оценка на абсолютната бионаличност.
Изборът на доза отразява малки молекули, като включва съображения като фармакологично активни дози в животински модели, междувидово мащабиране или клинични диапазони на дозиране.
Изборът на животински видове за фармакокинетични изследвания е в съответствие с фармакологичните и токсикологичните изследвания, обикновено включващи гризачи и примати. Достатъчни са фармакокинетични проучвания при един пол, като разликите между половете се оценяват в последващи токсикологични проучвания с многократни дози.
2. Проучвания за ФК/ТК с многократни дози:
Препоръчва се както в не-GLP, така и в GLP токсикологични проучвания,PK/TK проучвания с многократни дозиследват принципи, подобни на малките молекули/биологични продукти. Данните за ФК/ТК от ден 1 могат да заменят ФК проучвания с еднократна доза, като предлагат предимства по отношение на време, разходи и спестявания на животни.
Изискванията за фармакокинетични изследвания с многократни дози, включително начини на приложение, дози, подбор на видове, матрици на проби и аналитични методи, съответстват на ФК с еднократна доза.
Отчитането на тъканния полуживот, времевите точки за вземане на проби и пропорционалните на дозата връзки е от жизненоважно значение при проучванията с многократни дози PK/TK, заедно с откриването на антитела срещу лекарства (ADA), когато е показано.
II. Разпределение
Експериментите с разпределение имат за цел да изяснят експозицията на тъканите и органите, като информират за потенциалната токсичност на целевите органи и честотата на дозиране.
1. In vitro тестове за свързване с плазмени протеини (PPB):
PPB анализите разкриват уникалните характеристики на свързване на ONs с плазмените протеини, влияещи върху проникването в тъканите и фармакологичната активност. Модификациите на ON значително влияят на свързването на PPB, като съображенията се простират до разликите между видовете и начините на приложение.
2. In vivo изследвания на разпределението в тъканите:
За разлика от традиционните биологични лекарства, проучванията за тъканно разпределение за ONs се провеждат по-рано, по време на подбора на кандидати, за да се оцени ефикасността на доставяне. Дизайнът на изследването отразява лекарства с малка молекула, което налага внимателен подбор на видове, дози и времеви точки за вземане на проби.
3. Методи за анализ и събиране на тъкани:
По-скоро квалификация, отколкото валидиране, е достатъчна за методите за откриване на концентрацията на лекарства в изследванията на тъканното разпределение. Съображенията за придобиване на тъкан се простират до разликите в консистенцията между различните животни и избора между радиомаркирани и нерадиомаркирани методи.
4. Специални съображения:
За конюгирани ONs и LNPs е наложителна цялостна оценка на тъканното разпределение, включително изследване на метаболити и нови компоненти на формулировката.
В заключение, бялата книга на OSWG служи като решаващ крайъгълен камък в напредъка в разбирането и прилагането на най-добрите практики в характеризирането на ADME на ONs лекарства, предлагайки ценна информация за процесите на усвояване и разпространение, които са от съществено значение за успешното разработване на лекарства.
